產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES產(chǎn)品中心/ products
簡(jiǎn)要描述:高效脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑U-300 細(xì)胞培養(yǎng)UBI轉(zhuǎn)染試劑U-300 (U-300 Transfection Reagent)是在前幾代轉(zhuǎn)染試劑基礎(chǔ)上,再次創(chuàng)新包含最為良好的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),追求更優(yōu)良的轉(zhuǎn)染性能,此試劑具有優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率,并可提高細(xì)胞活性,廣泛適用于難轉(zhuǎn)染的及常見(jiàn)的細(xì)胞種類(例如HEK 293和Hela細(xì)胞)。
品牌 | YOBIBIO/攸碧艾 | 貨號(hào) | U33-300B |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 0.75ml | 供貨周期 | 一周 |
主要用途 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
提供優(yōu)良的性能,以針對(duì)難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系實(shí)現(xiàn)了較高轉(zhuǎn)染效率的試劑
轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞作用溫和,毒性很低
相比其他轉(zhuǎn)染試劑具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的用量 適用細(xì)胞更加廣泛,有效轉(zhuǎn)染難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系
能有效轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型包括:
肺癌細(xì)胞(A549、NCI-H460)骨肉瘤細(xì)胞(U-2 OS、Saos-2)
結(jié)腸癌細(xì)胞(Caco2、SW480)胰腺癌細(xì)胞(PANC-1)
皮膚黑色素瘤細(xì)胞(SK-MEL-28)成纖維細(xì)胞(3T3、COS-7)
肝細(xì)胞(HepG2、HuH7)紅白血病細(xì)胞(K562)
乳腺癌(MCF7、Hs578T)前列腺癌(LNCap)
成肌細(xì)胞(C2C12、L6 CRL-1458)
產(chǎn)品規(guī)格:
(備注:以下為常用規(guī)格,更多規(guī)格可根據(jù)客戶需求定制)
儲(chǔ)存事項(xiàng): 冰袋或者濕冰運(yùn)輸,短時(shí)間內(nèi)可室溫運(yùn)輸,但需避免光源熱源。
長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存于 4℃,切勿凍存,有效期24個(gè)月。
產(chǎn)品用于:僅供研究使用,不適用于人或動(dòng)物的體外診斷與治療。
由于實(shí)驗(yàn)受多種因素影響具有不確定性,本說(shuō)明書(shū)操作說(shuō)明僅供參考,最終解釋權(quán)歸本公司所有。
警告!產(chǎn)品對(duì)人體危害性未知,請(qǐng)遵循操作說(shuō)明。穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)眼鏡、衣服和手套!如果不小心接觸,應(yīng)立即用大量的水沖洗,如引起身體不適應(yīng)前往醫(yī)院治療。
注意事項(xiàng): 轉(zhuǎn)染siRNA至細(xì)胞時(shí),遵循如上所述的DNA實(shí)驗(yàn)方案,但在稀釋siRNA 時(shí)不要加入 B-300試劑。在無(wú)血清培養(yǎng)基中制備 DNA-U33-300復(fù)合物,直接將其加入含細(xì)胞培養(yǎng)基的細(xì)胞中。(有無(wú)血清或抗生素均可 ) 轉(zhuǎn)染后無(wú)需去除轉(zhuǎn)染復(fù)合物或者更換/添加培養(yǎng)。 整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程避免細(xì)胞污染,由于不同細(xì)胞耐受性不同,我們建議您在做批量實(shí)驗(yàn)前,可根據(jù)實(shí)際質(zhì)粒和細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,分不同梯度量先做預(yù)實(shí)驗(yàn),摸索良好DNA和U33-300 Transfection Reagent的混合比例。步驟里面測(cè)試推薦的兩種濃度的并非固定濃度,優(yōu)化后可根據(jù)自身細(xì)胞情況調(diào)整用量。
操作步驟:
(以六孔板的貼壁細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)染為例) 細(xì)胞準(zhǔn)備。
1.轉(zhuǎn)染前一天將細(xì)胞接種至六孔板內(nèi),細(xì)胞接種數(shù)量視其生長(zhǎng)速度和細(xì) 6 胞系類型而定,一般為0.5-1×10 個(gè)細(xì)胞。
2.轉(zhuǎn)染時(shí)要求細(xì)胞生長(zhǎng)的匯合度為70~90%,轉(zhuǎn)染前兩小時(shí)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行換液。(細(xì)胞狀態(tài)與轉(zhuǎn)染效果影響很大,選擇良好的細(xì)胞狀態(tài)更有利于轉(zhuǎn)染效率提高和轉(zhuǎn)后細(xì)胞狀態(tài)的恢復(fù)) 將3.75 μl和7.5 μl 的U33-300分別加至另外125 μl無(wú)血清的OPTI-MEM培 養(yǎng)基中,輕輕混勻,室溫靜置2-3分鐘。
3. 將5 ug 質(zhì)粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl無(wú)血清OPTI-MEM培養(yǎng)基稀釋,制 DNA 預(yù)混液勻,然后添加10 ul B300 試劑并充分混勻。
4.在每管已稀釋的U-300試劑中加入等體積稀釋的 DNA孵育10-15分鐘。
5.將DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔內(nèi),前后左右晃動(dòng)孔板混勻,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
6.轉(zhuǎn)染18-48小時(shí)后,倒置熒光顯微鏡下觀察熒光蛋白表達(dá),或加入抗性培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系單克隆。
用量參照表:
CONTACT
辦公地址:上海市松江區(qū)九亭鎮(zhèn)博安路377號(hào)立同商務(wù)國(guó)際3019-2025室TEL:021-64228065
EMAIL:3215157694@qq.com